期刊简介
《放射免疫学杂志》是经国家科委批准,由教育部主管、同济大学主办的专业性学术刊物。创刊于1988年,现已出版至17卷。双月 刊,大16开,每期80页,双月30日出版。 国内统一刊号:CN31-1680/R,国际标准刊号:ISSN1008-9810 邮发代号:4-665。主要报道我国放射免疫的研究成果及临床应用经验介绍。刊载内容有基础放射免疫、临床放射免疫、放射免疫分析技术等的论著及专 家述评、中医中药与放射免疫、临床实践与经验、工作报告、综述、 讲座等。适合放免工作者、各级医务人员和相关学科的人员阅读。
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- 杂志名称：放射免疫学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：同济大学
- 国际刊号：1008-9810
- 国内刊号：31-1680/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏
siRNA干扰人胃癌细胞系IGFBP2表达的实验研究
张薇；史良会
关键词：胃癌, 小干扰RNA, IGFBP2, 慢病毒载体
摘要：目的:利用慢病毒包装系统构建IGFBP2基因靶向的表达载体,转染到胃癌细胞株SGC-7901中,检测该细胞中基因表达的沉默效果,同时初步观察基因表达抑制后对细胞生物学行为的影响.方法:用反转录聚合酶链式反应检测各组细胞系中m-RNA(IGFBP2,IGF和IGFR)表达,同时利用western blot技术检测干扰前后IGFBP2、IGF和IGFR的蛋白表达水平,后用MTT方法检测细胞转染前后的增殖情况.结果:①初步筛选得到27个候选片段,对这些候选序列通过同源序列检索和进一步优选,终确定5'target 564-582位(ggttgcaga-caatggcgat)5'target923-943位(gcctgtacaacctcaaacagt)为靶序列,并选择一无关对照的发卡样DNA序列.②成功构建重组子PLL3.7 1,PLL3.7 2和PLL3.7 Con,利用酶切筛选和测序验证,分析其序列与设计完全一致.③转导48h后用荧光显微镜观察胃癌细胞可看见大量eGFP表达,经筛选转染细胞得到siRNA稳定表达的细胞系.④转染IGFBP2靶向siRNA(PLL3.7 1,PLL3.7 2)SGC-7901细胞,IGFBP2基因的表达水平明显降低,RNA水平上IGFBP2有73.9%的下调,在蛋白水平上有约77.8%的下调;转染无关siRNA(PLL3.7 Con)的SGC-7901细胞,IGFBP2 mRNA表达水平不降低.⑤从细胞增殖实验结果看,转染后的细胞生长比未转染的细胞要快.结论:①成功地构建出针对IGFBP2的siRNA表达载体PLL3.71,PLL3.72和无关siRNA表达载体PLL3.72Con,靶向siRNA表达载体转染胃癌细胞SGC-7901后能显著降低细胞中的IGFBP2表达.②通过siRNA沉默降低IGFBP2的表达后,将促进肿瘤细胞SGC-7901的生长.
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