期刊简介
《放射免疫学杂志》是经国家科委批准,由教育部主管、同济大学主办的专业性学术刊物。创刊于1988年,现已出版至17卷。双月 刊,大16开,每期80页,双月30日出版。 国内统一刊号:CN31-1680/R,国际标准刊号:ISSN1008-9810 邮发代号:4-665。主要报道我国放射免疫的研究成果及临床应用经验介绍。刊载内容有基础放射免疫、临床放射免疫、放射免疫分析技术等的论著及专 家述评、中医中药与放射免疫、临床实践与经验、工作报告、综述、 讲座等。适合放免工作者、各级医务人员和相关学科的人员阅读。
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- 杂志名称：放射免疫学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：同济大学
- 国际刊号：1008-9810
- 国内刊号：31-1680/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏
人UbcH10及其siRNA真核表达载体的构建与表达
陈世敏；徐春晓；刘斌；辛家璇；刘贤锡
关键词：UbcH10, 真核表达, siRNA
摘要：目的:构建以人泛素结合酶UbcH10基因为基础的真核表达质粒pcDNA3.1(UbcH10)及其siRNA表达载体pGPU6/GFP/Neo(siRNA-UbcH10),并在结肠癌细胞LOVO中表达与鉴定.方法:提取组织总RNA,通过RT-PCR扩增出UbcH10基因,克隆到真核表达载体pcDNA3.1的多克隆位点中,构建UbcH10的真核表达载体.通过siRNA设计软件选取ubcH10基因的siRNA片段合成构建表达载体pGPU6/GFP/Neo(siPdYA-UbcH10).然后采用脂质体转染法将其分别转染LOVO细胞,用RT-PCR在RNA水平和Western Blot在蛋白水平检测其在真核细胞中的表达.结果:测序结果显示克隆UbcH10基因片段序列完全正确;重组质粒转染LO-VO细胞后,检测到pcDNA3.1(UbcH10)转染组UbcH10表达增强,而pGPU6/GFP/Neo(siRNA-UbcH10)转染组UbcH10表达减弱.结论:成功构建真核表达质粒pcDNA3.1(UbeH10)及其siRNA表达载体pGPU6/GFP/Neo(siRNA-UbcH10),并在真核细胞中能有效表达,为今后进一步研究UbcH10的功能和作用机制奠定了基础.
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